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細胞生物學
細胞系/穩轉細胞株株構建
軟瓊脂法實驗
軟瓊脂法實驗是一種測定細胞轉化及致瘤性的實驗方法。該實驗需要細胞錨定非依賴性生長狀態(腫瘤細胞生長特性)。相比于2D單層培養,該3D培養法的生長條件可以更準確地反映出癌細胞的自然生長環境,因此動物實驗進行之前的軟瓊脂法實驗是至關重要的。 實驗前,將細胞(用致癌物質或致癌物抑制劑處理的)于軟瓊脂培養21-28天。而后,克隆子可經細胞染色法進行形態學分析并且計數。
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實驗流程:
1. 基層瓊脂
2. 在基層瓊脂上加入細胞瓊脂,培養6-8天
3. 形成克隆子
4. 溶解瓊脂(形成均質細胞懸液)
5. 細胞溶解并檢測
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